產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情

  • 產(chǎn)品名稱： 痰液基因組DNA提取試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào)： 200T
  • 產(chǎn)品廠商：通蔚生物
  • 產(chǎn)品價(jià)格：3105
  • 產(chǎn)品庫(kù)存：125
  • 產(chǎn)品文檔：
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簡(jiǎn)單介紹：
痰液基因組DNA提取試劑盒 本產(chǎn)品適合從 1ml 液化的痰液中分離純化總 DNA（包括基因組DNA、線粒體DNA及可能存在的細(xì)-菌、病毒 DNA）。被溶解的痰液經(jīng)裂解及蛋白酶K 消化后DNA將結(jié)合到純化柱上，降解的蛋白與 PCR 抑制物則被過(guò)濾除去，DNA 經(jīng)Buffer W1 和Buffer W2洗滌后，用 Buffer EB 洗脫，即可用于各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
詳情介紹：
產(chǎn)品及特點(diǎn)

本產(chǎn)品適合從 1ml 液化的痰液中分離純化總 DNA（包括基因組DNA、線粒體DNA及可能存在的細(xì)-菌、病毒 DNA）。被溶解的痰液經(jīng)裂解及蛋白酶K 消化后DNA將結(jié)合到純化柱上，降解的蛋白與 PCR 抑制物則被過(guò)濾除去，DNA 經(jīng)Buffer W1 和Buffer W2洗滌后，用 Buffer EB 洗脫，即可用于各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

它具有下列特點(diǎn)：
1. 簡(jiǎn)便快速；
2. 重復(fù)性好，產(chǎn)量高；
3. 完全去除污染物和抑制劑，便于下游應(yīng)用。

成分規(guī)格

Buffer SP

110ml

220ml

2×220ml

Buffer DT

11ml

22ml

44ml

Buffer GL

12ml

25ml

50ml

Buffer GTL

12ml

25ml

50ml

Buffer W1（concentrate）

13ml

26ml

52ml

Buffer W2（concentrate）

15ml

30ml

60ml

Buffer EB

10ml

10ml

30ml

Proteinase K

1ml

2×1ml

4×1ml

Spin Column with Collection Tubes

50套

100套

200套

蛋白酶 K 于-20℃，Buffer DT 于 4℃儲(chǔ)存，其他試劑與物品儲(chǔ)存于室溫（15-25℃）。

本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于其它用途


使用方法
自備試劑
無(wú)水乙醇。

使用前準(zhǔn)備
1. 如果離心機(jī)有制冷功能，請(qǐng)將溫度設(shè)置到 25℃。
2. 將水浴鍋溫度設(shè)置到 56℃。
3. 根據(jù)試劑瓶標(biāo)簽上的指示在 Buffer W1 和 Buffer W2 中加入無(wú)水乙醇，并在標(biāo)簽的方框中打勾作好“乙醇已加”的標(biāo)記。

DNA提取
1. 痰液化處理：估算痰液的體積，按痰液的 2 倍體積加入 Buffer SP，再加入200 μl BufferDT，混勻使痰液充分液化。
2. 取 1ml 液化的痰液加入到 1.5ml 離心管中，10000rpm 離心2 分鐘，棄上清液。
3. 加入 200 μl Buffer GTL 和 20μl Proteinase K，旋渦振蕩 15 秒混合均勻，再加入200μlBuffer GL，充分混勻，56℃水浴 10-20 分鐘至溶液清亮。
4. 冷卻至室溫，加入 200ul 無(wú)水乙醇，混勻。
5. 將一個(gè)離心吸附柱放入收集管中，將上一步所得溶液和絮狀沉淀轉(zhuǎn)移到吸附柱中，12,000 rpm 離心 1 min，棄收集管中的濾液。
6. 向吸附柱內(nèi)加入 500 μl 的 Buffer W1，室溫 12,000 rpm 離心30 sec，棄收集管中濾液。
（注意：按要求在 Buffer W1 中加入無(wú)水乙醇，用后及時(shí)蓋緊，以防乙醇揮發(fā)）
7. 向吸附柱內(nèi)加入 600 μl Buffer W2，室溫 12,000 rpm 離心30 sec，棄收集管中濾液。

（注 意：Buffer W2 為濃縮液，按要求加入無(wú)水乙醇，用后及時(shí)蓋緊，以防乙醇揮發(fā)）

8. 向吸附柱內(nèi)加入 500 μl Buffer W2，室溫 12,000 rpm 離心2 min，棄收集管中濾液。

（注 意：此步不能省略，否則殘留乙醇會(huì)影響基因組 DNA 的后續(xù)使用）

9. 將離心吸附柱置于一個(gè)新的 1.5 ml 塑料離心管（自備）中，加入50 - 100 μl Buffer EB，室溫放置 2 min，12,000 rpm 離心 1 min，離心管底溶液即基因組DNA。
（注 意：為增加洗脫效率，可將洗脫液 Buffer EB 在 60℃預(yù)熱。如需使用去離子水洗脫，可用NaOH調(diào)整其pH值在7.0 - 8.5之間，為了增加回收率，可將得到的溶液重新加入到吸附柱中，室溫放置2min，再次離心收集）

注意事項(xiàng)
1. 如 Buffer GTL 和 Buffer GL 產(chǎn)生沉淀，可在 56℃水浴溶解；
2. 所有離心步驟均為臺(tái)式離心機(jī)。
痰液基因組DNA提取試劑盒
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