成份 |
N+2 個樣品管 |
PCR 陰性對照 |
PCR陽性對照 |
PCR Magic Mix 3.0 |
各 20μL |
20μL |
20μL |
Skalicky煙霜霉病菌PCR 引物混合液 |
各2μL |
2μL |
2μL |
N+2個樣品DNA模板 |
各18μL |
-- |
-- |
PCR 陰性對照(水) |
-- |
18μL |
-- |
PCR 陽性對照(Skalicky煙霜霉病菌PCR陽性對照1000倍稀釋液) |
-- |
-- |
18μL |
使用方法:
成份
N+2 個樣品管
PCR 陰性對照
PCR陽性對照
PCR Magic Mix 3.0
各 20μL
20μL
20μL
Skalicky煙霜霉病菌PCR 引物混合液
各2μL
2μL
2μL
N+2個樣品DNA模板
各18μL
--
--
PCR 陰性對照(水)
--
18μL
--
PCR 陽性對照(Skalicky煙霜霉病菌PCR陽性對照1000倍稀釋液)
--
--
18μL
4. 按下表設置 PCR 反應:
過程 |
溫度 |
時間 |
預變性 |
95℃ |
5 min |
PCR 反應(35 個循環(huán)) |
95℃ |
30 sec |
55℃ |
30 sec |
|
72℃ |
40 sec |
|
延伸 |
72℃ |
7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴增,否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。