產(chǎn)品詳情
簡(jiǎn)單介紹：
磷酸丙糖異構(gòu)酶(TPI)測(cè)試盒由上海通蔚科研生物公司提供，通蔚商鋪產(chǎn)品包括磷酸丙糖異構(gòu)酶(TPI)活性測(cè)試盒價(jià)格; 規(guī)格; 包裝; 說(shuō)明書; 測(cè)定方法等生化試劑盒的詳細(xì)介紹，歡迎新老客戶前來(lái)選購(gòu)。
詳情介紹：
磷酸丙糖異構(gòu)酶(TPI)測(cè)試盒
測(cè)定方法: 微量法測(cè)定規(guī)格: 100T/96S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意 : 正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
植物葉綠體中磷酸丙糖異構(gòu)酶是光合作用中參與calvin循環(huán)的重要酶。作用于磷酸甘油醛和磷酸二羥丙酮之間的轉(zhuǎn)化,磷酸二羥丙酮能快速透過(guò)葉綠體的包膜進(jìn)入細(xì)胞質(zhì),并在其中逐步轉(zhuǎn)化為蔗糖。
測(cè)定原理:
磷酸丙糖異構(gòu)酶將磷酸二羥丙酮轉(zhuǎn)化為3-磷酸甘油醛,3-磷酸甘油醛與NAD在3-磷酸甘油醛脫氫酶的作用下生成3-磷酸甘油酸和NADH,340nm處的吸光度變化反映了磷酸丙糖異構(gòu)酶的活性的高低。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、研缽、震蕩儀、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板。
酶液提取
①總TPI酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體TPI酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿TPI酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中TPI酶活性。
建議測(cè)定總TPI酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的TPI,則按照步驟②提取粗酶液。