通蔚生物胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測(cè)試盒樣本的前處理

上海通蔚生物胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測(cè)試盒樣本的前處理

測(cè)定方法: 微量法
測(cè)定規(guī)格: 100管/96樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注    意: 正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
ICDHc(EC 1.1.1.42)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化異檸檬酸脫氫脫羧生成 α-酮戊二酸,同時(shí)還原NADP+生成NADPH。ICDHc是細(xì)胞質(zhì)中除了磷酸戊糖途徑外又一種NADPH重要來源,在逆境中該酶活性通常會(huì)發(fā)生顯著變化。
測(cè)定原理:
利用ICDHc催化NADP+還原成NADPH反應(yīng),在340 nm下測(cè)定NADPH濃度的增加。
所需的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣本的前處理:
1、細(xì)胞或組織樣品的制備:
培養(yǎng)細(xì)胞:先收集或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬或細(xì)胞加入1mL提取液),超聲波破碎或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
上海通蔚生物以誠信為本，努力打造的品牌，為您提供胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測(cè)試盒的售中、售前、售后服務(wù)，具有的技術(shù)團(tuán)隊(duì)，把產(chǎn)品引入國內(nèi)市場(chǎng)，滿足國內(nèi)廣大客戶的需求，在二十一世紀(jì)生命科學(xué)蓬勃發(fā)展的時(shí)代，將緊跟生命科學(xué)的發(fā)展動(dòng)態(tài)，為廣大科研學(xué)者探索生命的奧秘而奉獻(xiàn)綿薄之力！