通蔚生物乳酸脫氫酶(LDH)測試盒樣品測定的準(zhǔn)備工作

通蔚生物乳酸脫氫酶(LDH)測試盒樣品測定的準(zhǔn)備工作如下：

測定方法:  微量法
測定規(guī)格:  100管/48樣
保存條件:  低溫避光保存
有 效 期:   6個月
注    意:   正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
LDH(EC 1.1.1.27)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是糖酵解途徑的末端酶,催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應(yīng),伴隨著NAD+/NADH之間互變。
測定原理:
LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸進一步與2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在堿性溶液中顯棕紅色,顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品測定的準(zhǔn)備:
細(xì)胞或組織樣品的制備:
培養(yǎng)細(xì)胞:先收集或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照或細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為1000~5000:1的比例(建議2000萬或細(xì)胞加入1mL提取液),超聲波破碎細(xì)-菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。血清(漿)樣品:直接檢測。
上海通蔚實業(yè)有限公司是一家科研和銷售科學(xué)乳酸脫氫酶(LDH)測試盒試劑產(chǎn)品，領(lǐng)域涵蓋化學(xué)、分析化學(xué)、生命科學(xué)和材料科學(xué)等基礎(chǔ)領(lǐng)域，助力客戶的研究計劃。公司產(chǎn)品有ELISA試劑盒、細(xì)胞培養(yǎng)、金標(biāo)檢測試劑盒、食品檢測試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、胎牛血清、科研抗體、生物耗材等。