檢測抗原常用的方法

ELISA 可用于測定抗原，也可用于測定抗體。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件，可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。以下介紹檢測抗原常用的方法操作步驟。

雙抗體夾心法是檢測抗原常用的方法，操作步驟如下：

1）將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。

2）加受檢標(biāo)本，保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。

3）加酶標(biāo)抗體，保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。

4）加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色，測知標(biāo)本中抗原的量。

在臨床檢驗中，此法適用于檢驗各種蛋白質(zhì)等大分子抗原，例如 HBsAg、HBeAg、AFP、hCG 等。只要獲得針對受檢抗原的特異性抗體，就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清，包被和酶標(biāo)用的抗體分別取自不同種屬的動物。如應(yīng)用單克隆抗體，一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗，分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性，而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng)，作一步檢測。

上海通蔚生物科技有限公司專注于生物領(lǐng)域多年,專業(yè)為廣大新老客戶提供實驗方案,技術(shù)服務(wù),生化試劑盒,Elisa試劑盒,各類生物試劑等產(chǎn)品,公司產(chǎn)品齊全,質(zhì)量保障,為廣大客戶服務(wù)!