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如何選擇ELISA試劑盒的方法
日期：2024-12-22 11:35
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摘要：
一、 原料及制造粗糙的試劑盒
表現(xiàn)在：準(zhǔn)確度不高，重復(fù)性不好。
原因可能為抗體配對效果不是佳，抗體識(shí)別抗原的表位容易被破壞，包被抗體或檢測抗體雜蛋白較多，沒有純化或純化效果不好，影響檢測的靈敏度和準(zhǔn)確度。
客戶辯別檢測方法：
1.可采用已知濃度的重組細(xì)胞因子，稀釋到檢測范圍內(nèi)作為樣本加入，看檢測的準(zhǔn)確性。
2.對用待測指標(biāo)的重組細(xì)胞因子做試劑盒說明書上標(biāo)定的zui小濃度稀釋，可測出靈敏度，建議5個(gè)復(fù)孔以上才有意義。一般廠家以20個(gè)復(fù)孔做出的結(jié)果作為檢測限。用此實(shí)驗(yàn)可驗(yàn)證出所購試劑盒的靈敏度是否如說明書所述，也可判斷出所購試劑盒是否有夸大之說。
3.選定一個(gè)檢測范圍內(nèi)的濃度做多孔重復(fù)，可看出平行性好不好。即板內(nèi)CV值的大小，此操作時(shí)需要小心加樣的準(zhǔn)確性。對一些制作較粗糙的試劑盒來說，板間CV值是較大的。
4.如果有相同指標(biāo)的進(jìn)口試劑盒，可用對方的標(biāo)準(zhǔn)品作為樣本，分別加入各自的試劑盒做檢測，以檢測試劑盒的真實(shí)性，準(zhǔn)確性。如其中一種是的進(jìn)口試劑盒，比較可靠的話，可作為標(biāo)準(zhǔn)來驗(yàn)證另一試劑盒的準(zhǔn)確程度。
二、檢測樣本類型的判斷
目前ELISA試劑盒檢測的
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一、 原料及制造粗糙的試劑盒
表現(xiàn)在：準(zhǔn)確度不高，重復(fù)性不好。
原因可能為抗體配對效果不是佳，抗體識(shí)別抗原的表位容易被破壞，包被抗體或檢測抗體雜蛋白較多，沒有純化或純化效果不好，影響檢測的靈敏度和準(zhǔn)確度。
客戶辯別檢測方法：
1.可采用已知濃度的重組細(xì)胞因子，稀釋到檢測范圍內(nèi)作為樣本加入，看檢測的準(zhǔn)確性。
2.對用待測指標(biāo)的重組細(xì)胞因子做試劑盒說明書上標(biāo)定的zui小濃度稀釋，可測出靈敏度，建議5個(gè)復(fù)孔以上才有意義。一般廠家以20個(gè)復(fù)孔做出的結(jié)果作為檢測限。用此實(shí)驗(yàn)可驗(yàn)證出所購試劑盒的靈敏度是否如說明書所述，也可判斷出所購試劑盒是否有夸大之說。
3.選定一個(gè)檢測范圍內(nèi)的濃度做多孔重復(fù)，可看出平行性好不好。即板內(nèi)CV值的大小，此操作時(shí)需要小心加樣的準(zhǔn)確性。對一些制作較粗糙的試劑盒來說，板間CV值是較大的。
4.如果有相同指標(biāo)的進(jìn)口試劑盒，可用對方的標(biāo)準(zhǔn)品作為樣本，分別加入各自的試劑盒做檢測，以檢測試劑盒的真實(shí)性，準(zhǔn)確性。如其中一種是的進(jìn)口試劑盒，比較可靠的話，可作為標(biāo)準(zhǔn)來驗(yàn)證另一試劑盒的準(zhǔn)確程度。
二、檢測樣本類型的判斷
目前ELISA試劑盒檢測的樣本中，除了細(xì)胞上清外，還有比較大的一部分是血清和血漿樣本，有些試劑盒對血清和血漿樣本的檢測效果不好，表現(xiàn)在光值偏低，如RF因子存在的話，光值偏高。
購買產(chǎn)品的實(shí)驗(yàn)者如何分辨呢？
對說明書上有說能做血清血漿的試劑盒，如有緩沖液。建議如下：用已知濃度的待測指標(biāo)蛋白加入所測種屬的血清直接加樣和用分析緩沖液按說明書分別加樣，得出結(jié)果如差異過大，即可得知分析緩沖液的效果如何，是否確實(shí)有作用。
三、試劑盒的選購方法
1.可以對常規(guī)品種的指標(biāo)，因?yàn)樾枰枯^大，所以國內(nèi)公司會(huì)用心做研發(fā)，一般做的不錯(cuò)，可以用國產(chǎn)的；對于不常用的指標(biāo)，因?yàn)橛昧可?，國?nèi)公司一般不做研，所以會(huì)用國外的。國產(chǎn)和進(jìn)口盒子一起用，節(jié)省經(jīng)費(fèi)而且高。
2.可以咨詢該公司的技術(shù)人員，看看是否專業(yè)。
3.對其公司要做一個(gè)了解，對新的公司還要謹(jǐn)慎考慮。
以上是如何選擇ELISA試劑盒方法，您都了解了嗎？