ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程必知小知識(shí)
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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程必知小知識(shí):
① 建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè),取平均值,以減小實(shí)驗(yàn)誤差。
② 若顯色過(guò)淺,可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)。
③ 實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
④ 酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
⑤ 標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè),如有**污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng),保存過(guò)久可發(fā)生聚合在ELISA中可使本底加深。
⑥ 凍結(jié)標(biāo)本溶解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛混合,不要在混勻器上強(qiáng)烈震蕩。
⑦ 渾濁或有沉淀的標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢測(cè)。
⑧ 反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)降低,所以代測(cè)樣本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存。
ELISA試劑盒的質(zhì)量操控方法:
1、規(guī)則操控目標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)(預(yù)期值)。
2、確定操控的目標(biāo)。
3、丈量實(shí)踐數(shù)據(jù)。
4、對(duì)比或較對(duì)實(shí)踐數(shù)據(jù)與預(yù)期值之間的區(qū)別,并說(shuō)明發(fā)生這一區(qū)別的因素,超出**差錯(cuò)規(guī)模,報(bào)警系宣布信號(hào),反響通道中止。
5、制定或挑選操控辦法和手法。
6、采納舉動(dòng),處理區(qū)別,恢復(fù)原狀(原標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài))的手法發(fā)揮作用。