ELISA過程中的洗板

ELISA實驗原理簡單，步驟少，流程短，試劑盒操作相對簡便，實驗小白也能輕松上手。然而，實驗上手雖快，想要得到可靠的實驗結果，卻并不那么容易。
    洗板在ELISA過程中雖不是一個反應步驟，但卻是決定試驗成敗的關鍵。ELISA就是靠洗板來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的，通過洗板以清洗殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質，以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的，而在洗板時應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。在ELISA操作中，洗滌是主要的關鍵技術，應嚴格按要求洗滌。洗板如不徹底，有酶結合物的非特異性吸附，將使空白值升高。另外，在間接法中如血清標本內的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈，也將與酶標記抗體作用而產生干擾。
1.各廠家的洗液是根據(jù)各自試劑的條件配制的，因此采用不配套的洗液常會得到不正常的反應結果，包括本底升高，所以不同廠家的洗液不應混用。
 2. 洗液應按規(guī)定的倍數(shù)稀釋使用。試劑盒提供的洗液是濃縮的，過多稀釋洗液，會影響洗液的效果，而使反應的本底升高。反之造成假陰性。
 3. 稀釋洗液的水應該是新鮮的蒸餾水，電導率小于1.5us/cm。如果水中含有過多的鈣、鎂離子，這些離子會占用表面活性劑，使試驗本底增高。
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