ELISA檢測(cè)試劑盒添加的步驟

日期：2024-12-22 03:38

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摘要：

ELISA檢測(cè)試劑盒的原理基于特異性抗體與待檢測(cè)分子之間的特異性結(jié)合反應(yīng)。一般而言，ELISA包括固相抗體的固定、樣品的加入、特異性抗體的結(jié)合、酶標(biāo)記抗體的結(jié)合以及底物的添加等步驟。具體步驟如下：

1. 固相抗體的固定：在檢測(cè)板上涂覆特異性抗體。這些抗體通常被固定在多孔板表面，如96孔板。固相抗體的選擇取決于待測(cè)分子的特異性。

2. 樣品的加入：將待測(cè)樣品加入涂有固相抗體的檢測(cè)孔中，讓樣品中的目標(biāo)分子與固相抗體結(jié)合。

3. 特異性抗體的結(jié)合：經(jīng)過洗滌步驟后，特異性抗體（標(biāo)記抗體）與已結(jié)合在固相上的目標(biāo)分子結(jié)合。特異性抗體通常與酶標(biāo)記結(jié)合，以便后續(xù)檢測(cè)步驟中的酶活性測(cè)量。

4. 酶標(biāo)記抗體的結(jié)合：經(jīng)過洗滌步驟后，酶標(biāo)記抗體與特異性抗體結(jié)合，形成特異性抗體-酶標(biāo)記抗體復(fù)合物。該復(fù)合物具有較強(qiáng)的酶活性。

5. 底物的添加：加入適當(dāng)?shù)牡孜?，使酶?biāo)記的特異性抗體產(chǎn)生可測(cè)量的信號(hào)。底物的選擇取決于所使用的酶。

通過測(cè)量底物的反應(yīng)產(chǎn)物，可以確定目標(biāo)分子的存在和濃度。ELISA檢測(cè)試劑盒的原理靈敏度高、特異性強(qiáng)，因此成為許多生物學(xué)實(shí)驗(yàn)研究和臨床診斷中的優(yōu)選方法。