通蔚生物:如何選擇一抗
一抗選擇
(1)確定抗體的名字,注意中英文名字、別名、亞型等信息。
(2)確定實(shí)驗(yàn)樣本的種屬,Human,Mouse,Rat等。我們的抗體說(shuō)明書都列出該抗體驗(yàn)證過(guò)的適用物種,可根據(jù)說(shuō)明書列出已驗(yàn)證的種屬來(lái)選擇適合你實(shí)驗(yàn)需要的抗體。
(3)確定您的實(shí)驗(yàn)類型,Elisa,WB,IHC,ICC,或者是FACS。biorbyt的每種抗體說(shuō)明書都會(huì)列出抗體經(jīng)驗(yàn)證過(guò)適用的實(shí)驗(yàn)類型,如果抗體說(shuō)明書沒(méi)有提及的應(yīng)用類型,并不意味著該抗體不適用于此種分析應(yīng)用類型,而僅是說(shuō)明尚未經(jīng)過(guò)此種實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。
(4)單多克隆抗體的選擇。一般單克隆抗體特異性強(qiáng),但親和力相對(duì)小,檢測(cè)抗原靈敏度相對(duì)就低;而多克隆抗體特異性稍弱,但抗體的親和力強(qiáng),靈敏度高,但易出現(xiàn)非特異性染色(可以通過(guò)封閉等避免)。
(5)樣本抗原蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)。了解樣本抗原蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)有助于選擇合適的抗體,待測(cè)樣本蛋白的結(jié)構(gòu)域和樣本在提取和處理過(guò)程中是否會(huì)變性,蛋白空間構(gòu)象的改變,會(huì)影響抗體的免疫親和反應(yīng)。
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