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必看ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
日期：2024-12-22 20:27
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摘要：ELSA即酶聯(lián)免疫吸附測定，是一類常用的免疫酶技術(shù)。主要方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，然后利用酶標(biāo)記的抗體或抗原與之孵育，加入顯色劑顯色，通過酶標(biāo)儀測定待測物顏色與標(biāo)準(zhǔn)物顏色的差異，繪制出酶活曲線得出待測物濃度。ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。
ELISA實(shí)驗(yàn)中有三種必要的試劑:
1、固相的抗原或抗體(用于結(jié)合到固相載體上)
2、標(biāo)記的抗原或抗體(標(biāo)記物)
3、作用的底物(顯色劑，用于顯色)
ELISA試劑盒選擇要素:
1、特異性:ELISA試劑盒的特異性于試劑盒的關(guān)鍵組分，抗體對有關(guān)，若抗體對中為多抗，另一個(gè)必須為單抗，建議使用雙單抗，
2、靈敏度:靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的低量的能力，用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標(biāo)的量選擇合適的試劑盒，如果待檢指標(biāo)量很低，一般的試劑盒不能滿足要求，可選擇高敏的ELISA試劑盒。
3、重復(fù)性:科學(xué)實(shí)驗(yàn)講求重復(fù)性，一般ELISA試劑盒，期板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在15%以內(nèi)。
4、簡便性:試劑盒在保證高質(zhì)量數(shù)據(jù)的情況下，實(shí)驗(yàn)時(shí)間越短，操作越便利，越容易受到用戶歡迎。
ELISA實(shí)驗(yàn)的原理
ELISA試劑盒即酶聯(lián)免疫吸附測定，是一類常用的免疫酶技術(shù)。主要方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，然后利用酶標(biāo)記的抗體或抗原與之孵育，加入顯色劑顯色，通過酶標(biāo)儀測定待測物顏色與標(biāo)準(zhǔn)物顏色的差異，繪制出酶活曲線得出待測物濃度。ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。
ELISA實(shí)驗(yàn)中有三種必要的試劑:
1、固相的抗原或抗體(用于結(jié)合到固相載體上)
2、標(biāo)記的抗原或抗體(標(biāo)記物)
3、作用的底物(顯色劑，用于顯色)
ELISA試劑盒選擇要素:
1、特異性:ELISA試劑盒的特異性于試劑盒的關(guān)鍵組分，抗體對有關(guān)，若抗體對中為多抗，另一個(gè)必須為單抗，建議使用雙單抗，
2、靈敏度:靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的低量的能力，用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標(biāo)的量選擇合適的試劑盒，如果待檢指標(biāo)量很低，一般的試劑盒不能滿足要求，可選擇高敏的ELISA試劑盒。
3、重復(fù)性:科學(xué)實(shí)驗(yàn)講求重復(fù)性，一般ELISA試劑盒，期板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在15%以內(nèi)。
4、簡便性:試劑盒在保證高質(zhì)量數(shù)據(jù)的情況下，實(shí)驗(yàn)時(shí)間越短，操作越便利，越容易受到用戶歡迎。
ELISA實(shí)驗(yàn)的原理:
1、包被:抗原或者抗體能以物理性吸附于固相載體表面，原因是蛋白質(zhì)和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，吸附之后能保持抗原反應(yīng)等免疫活性:
2、標(biāo)記:抗原或者抗體可通過共價(jià)鍵與酶連接成酶結(jié)合物而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫活性和酶的催化特點(diǎn):
3、顯色:酶結(jié)合物與相應(yīng)包被在固相載體的抗原或抗體結(jié)合后，也被固定在固相載體上，加入酶的底物之后可出現(xiàn)顯色反應(yīng)，根據(jù)反應(yīng)的顏色深淺可計(jì)算抗原或者抗體的相對含量。
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