產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱: M-MLV 反轉(zhuǎn)錄酶

  • 產(chǎn)品型號(hào): 100000 U
  • 產(chǎn)品廠商:通蔚生物
  • 產(chǎn)品價(jià)格:3680
  • 產(chǎn)品庫存:115
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
M-MLV 反轉(zhuǎn)錄酶本產(chǎn)品采用大腸桿菌表達(dá)體系,是經(jīng)過高度純化的重組酶。該酶的RNA酶H活性很低,具有更高的熱穩(wěn)定性,廣泛應(yīng)用于首鏈 cDNA 的合成,反轉(zhuǎn)錄溫度高達(dá)55°C,特異性和 cDNA 產(chǎn)量明顯提高,長度明顯大于首、二代反轉(zhuǎn)錄酶。本產(chǎn)品適合于從各種組織中提取的總 RNA 或 mRNA 為模板合成 cDNA 首鏈、實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR、3’-和 5’-RACE 等。
詳情介紹:
產(chǎn)品特點(diǎn)
本產(chǎn)品采用大腸桿菌表達(dá)體系,是經(jīng)過高度純化的重組酶。該酶的RNA酶H活性很低,具有更高的熱穩(wěn)定性,廣泛應(yīng)用于鏈 cDNA 的合成,反轉(zhuǎn)錄溫度高達(dá)55°C,特異性和 cDNA 產(chǎn)量明顯提高,長度明顯大于、二代反轉(zhuǎn)錄酶。本產(chǎn)品適合于從各種組織中提取的總 RNA 或 mRNA 為模板合成 cDNA 首鏈、實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR、3’-和 5’-RACE 等。

它具有下列特點(diǎn):
1. 逆轉(zhuǎn)錄效率高,鏈 cDNA 產(chǎn)量高;
2. 長可合成 5 kb 的 cDNA 片段;
3. 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的模板總 RNA 范圍可以在 10 ng-5 μg 之間。。

成分規(guī)格

產(chǎn)品組成

規(guī)格

M-MLV 反轉(zhuǎn)錄酶(200 U/μl)

50μl/500μl

5×RT Buffer(含 0.25M DTT)

 1ml/5*1ml

-20℃,有效期 1 年

本產(chǎn)品僅供科研使用 ,不得用于其它用途

使用方法
注 意:總反應(yīng)體積為20 μl,總RNA的量為10 ng - 5 μg,若起始RNA的量小于50 ng,則建議加入RNA酶抑制劑RNasin)
1. 將5× RT Buffer和M-MLV 反轉(zhuǎn)錄酶溶解并置于冰上備用,準(zhǔn)備好RNA模板、引物(oligo dT,隨機(jī)引物,或者二者的Primer Mix、或者特異性引物),dNTPMix、DEPC-ddH2O等。
2. 在無 RNase的PCR管中加入引物,總 RNA (10 ng - 5 μg)或mRNA(1 - 500 ng),4μldNTP (2.5 mM each),4 μl 5 × RT Buffer,1 μl M-MLV 反轉(zhuǎn)錄酶,補(bǔ)足DEPC-ddH2O至 20 μl。
3. 振蕩混勻,離心數(shù)秒使反應(yīng)液聚集于 PCR 管底部。
4. 42℃保溫 15-60 min。85℃孵育 5min,反應(yīng)結(jié)束后,短暫離心,置于冰上冷卻。
5. 該產(chǎn)物可直接用于二鏈的合成或 RT- PCR 擴(kuò)增反應(yīng),保存請(qǐng)置于-20℃。
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