產品中心
產品詳情

  • 產品名稱： HotStart Taq Plus DNA Polymerase(含預混Mg2+的10×Taq Plus Buffer)

  • 產品型號： 500 U,2.5 U/ul
  • 產品廠商：通蔚生物
  • 產品價格：897
  • 產品庫存：113
  • 產品文檔：
你添加了1件商品 查看購物車
簡單介紹：
HotStart Taq Plus DNA Polymerase(含預混Mg2+的10×Taq Plus Buffer)Taq Plus DNA Polymerase 是從克隆有 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大腸桿菌經誘導表達后分離純化的，其分子量為 94 KD，經與 Pfu 按一定比例混合而成，該酶可增強擴增的保真性，大大增強擴增的特異性和擴增效率。Hotstart Taq Plus DNAPolymerase 是抗體修飾熱啟動酶，具有 5’-3’DNA 聚合酶活性和5’-3’外切核酸酶活性，無3’-5’外切酶活性。在 PCR 中，該酶延伸速度為 2-3kb/min，產物3’端帶A，可直接用TA載體克隆。一般用于 DNA 片段的 PCR 擴增、DNA 標記、引物延伸、序列測定等.
詳情介紹：
Taq Plus DNA Polymerase 是從克隆有 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大腸桿菌經誘導表達后分離純化的，其分子量為 94 KD，經與 Pfu 按一定比例混合而成，該酶可增強擴增的保真性，大大增強擴增的特異性和擴增效率。Hotstart Taq Plus DNAPolymerase 是抗體修飾熱啟動酶，具有 5’-3’DNA 聚合酶活性和5’-3’外切核酸酶活性，無3’-5’外切酶活性。在 PCR 中，該酶延伸速度為 2-3kb/min，產物3’端帶A，可直接用TA載體克隆。一般用于 DNA 片段的 PCR 擴增、DNA 標記、引物延伸、序列測定等。

成分規(guī)格

產品組成

規(guī)格

HotStart Taq DNA polymerase

250Ｕ/ 2.5U/μl

10 × Taq Plus Buffer（含 Mg2+）

1m / 2*1 ml

-20℃，有效期 1 年

本產品僅供科研使用，不得用于其它用途


使用方法
（注 意：以下舉例為常規(guī)PCR反應體系和反應條件，實際操作中應根據(jù)模板、引物結構和目的片段大小不同進行相應的調整和優(yōu)化）
1. PCR 體系：
推薦體系（50μl）

試劑

用量

模板 DNA

< 1μg

10 × Taq Buffer

5μl

dNTP Mixture(2.5 mM each)

4μl

Primer 1 (10 μM)

2μl

Primer 2 (10 μM)

2μl

Hotstart t Taq Plus DNA Polymerase (2.5 U/μl)

0.5 ~ 1μl

ddH2O

Up to 50μl


注 意：
A 引物濃度請以終濃度 0.1-1.0μM 作為設定范圍的參考。擴增效率不高的情況下，可提高引物的濃度；發(fā)生非特異性反應時，可降低引物濃度，由此優(yōu)化反應體系。
B 鎂離子濃度請以終濃度 1.5-3mM 作為設定范圍的參考?？筛鶕?jù)不同的引物對和模板來調節(jié)鎂離子濃度，由此優(yōu)化反應體系）
2. PCR 程序

過程

溫度

時間

預變性

94℃

5min

25－35cycles

變性

94℃

30sec

退火

55－65℃

30sec

延伸

72℃

1kb/30sec

終延伸

72℃

5min


注 意：
A 一般實驗中退火溫度比擴增引物的熔解溫度 Tm 低 5℃，無法得到理想的擴增效率時，適當降低退火溫度；發(fā)生非特異性反應時，提高退火溫度，由此優(yōu)化反應條件。
b 延伸時間應根據(jù)所擴增片段大小設定，Hotstart Taq Plus DNA Polymerase 的擴增效率為 1 kb/20-30 sec。
C 可根據(jù)擴增產物的下游應用設定循環(huán)數(shù)。如果循環(huán)次數(shù)太少，擴增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，錯配機率會增加，非特異性背景嚴重。所以，在保證產物得率的前提下，應盡量減少循環(huán)次數(shù)）
3. 結果檢測：
反應結束后取 5 μl 反應產物，加入適量上樣緩沖液后進行瓊脂糖凝膠電泳檢測。
姓名：
電話：
您的需求：