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產(chǎn)品詳情

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產(chǎn)品名稱：血液基因組DNA小量提取試劑盒(0.1-1ML)
產(chǎn)品型號(hào)： 200T
產(chǎn)品廠商：通蔚生物
產(chǎn)品價(jià)格：1495
產(chǎn)品庫存：136
產(chǎn)品文檔：

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簡(jiǎn)單介紹：

血液基因組DNA小量提取試劑盒(0.1-1ML)本試劑盒適用于各種新鮮及抗凝劑（檸檬酸鈉、EDTA 等）處理過的全血基因組 DNA 大量提取。DNA 特異吸附到硅膠膜上，通過簡(jiǎn)單漂洗去除雜質(zhì)，可快速純化得到基因組 DNA 。使用本試劑盒得到的血液基因組 DNA 無蛋白、核酸酶污染，可直接進(jìn)行 PCR 、酶切和雜交等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

詳情介紹：

血液基因組DNA小量提取試劑盒(0.1 - 1 m L)
產(chǎn)品及特點(diǎn)
本試劑盒適用于各種新鮮及抗凝劑（檸檬酸鈉、EDTA 等）處理過的全血基因組 DNA 大量提取。DNA 特異吸附到硅膠膜上，通過簡(jiǎn)單漂洗去除雜質(zhì)，可快速純化得到基因組 DNA 。使用本試劑盒得到的血液基因組 DNA 無蛋白、核酸酶污染，可直接進(jìn)行 PCR 、酶切和雜交等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

它具有下列特點(diǎn)：
1. 適用范圍廣：可從抗凝血、白膜層和禽類血等樣品中直接提取DNA；
2. 操作簡(jiǎn)便：無需有機(jī)試劑沉淀，可快速獲得高純度的血液基因組DNA；
3. 純度高：去除污染物和抑制劑徹底，便于下游應(yīng)用。

成分規(guī)格

Buffer GL	12ml	25ml	50ml
Buffer EB	10ml	10ml	30ml
Buffer W1（concentrate）	13ml	26ml	52ml
Buffer W2（concentrate）	15ml	30ml	60ml
Proteinase K	1ml	2×1ml	4×1ml
Spin Columnwith Collection Tubes	50套	100套	200套
蛋白酶K 于-20℃, 其他組分室溫（15 - 25℃) , 可保存 12 個(gè)月
本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于其它用途

使用方法
自備試劑
無水乙醇、RNase A（可選）。

（注意：使用前請(qǐng)先在緩沖液 Buffer W1 和 Buffer W2 中加入無水乙醇，加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽）

1. 在1.5 ml 滅-菌離心管中加入 20 μl Proteinase K，200 μl 哺乳動(dòng)物鮮血或抗凝血。（注意：如果處理血樣為禽類、鳥類、兩棲類或更低級(jí)生物的抗凝血液，其紅細(xì)胞為有核細(xì)胞，因此處理量 5-15 μl，可加緩沖液 PBS 或生理鹽水補(bǔ)足 200 μl 后進(jìn)行下面的裂解步驟，如要去除RNA，可加入 4 μl RNase A(100 mg/ml)，混勻，靜置 5 min）

2. 加入 200 μl Buffer GL，渦旋混勻 15 sec，56℃水浴 10 min。

（注意：期間每隔一段時(shí)間震蕩離心管，至溶液變得清亮）

3. 加入 200 μl 無水乙醇，充分震蕩，短暫離心以去除管蓋內(nèi)壁液體。

4. 將吸附柱放入收集管，將上一步所得溶液全部加入吸附柱中，12,000 rpm離心1min，棄收集管中濾液。

5. 向吸附柱內(nèi)加入 500 μl Buffer W1，室溫 12,000 rpm 離心30 sec，棄收集管中濾液。（注意：按要求在 Buffer W1 中加入無水乙醇，用后及時(shí)蓋緊，以防乙醇揮發(fā)）

6. 向吸附柱內(nèi)加入 600 μl Buffer W2，室溫 12,000 rpm 離心30 sec，棄收集管中濾液。（注意：Buffer W2 是濃縮液，按要求加入無水乙醇，用后及時(shí)蓋緊，以防乙醇揮發(fā)）

7. 向吸附柱內(nèi)加入 500 μl Buffer W2，室溫 12,000 rpm 離心30 sec，棄收集管中濾液。

8. 干燥。將離心吸附柱于 12,000 rpm 離心 2 min，甩干殘留漂洗液。

（注意：此步不能省略，否則殘留乙醇會(huì)影響基因組 DNA 的后續(xù)使用）

9. 將離心吸附柱置于一個(gè)新的 1.5 ml 塑料離心管（自備）中，加入50 - 100 μl Buffer EB，室溫放置 2 min，12,000 rpm 離心 1 min，離心管底溶液即基因組DNA。

（注意：為增加洗脫效率，可將洗脫液 Buffer EB 在 60℃預(yù)熱。如需使用去離子水洗脫，可用NaOH調(diào)整其pH值在7.0 - 8.5之間，為了增加回收率，可將得到的溶液重新加入到吸附柱中，室溫放置2min，再次離心收集）

注意事項(xiàng)

1. 如 Buffer GL，Buffer W1 產(chǎn)生沉淀，可在 56℃水浴溶解。

2. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致提取的 DNA 片段小，提取量下降。

3. 所有離心步驟均為臺(tái)式離心機(jī)，室溫下操作。

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