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產(chǎn)品詳情

  • 產(chǎn)品名稱：石蠟包埋組織基因組DNA提取試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào)： 200T
  • 產(chǎn)品廠商：通蔚生物
  • 產(chǎn)品價(jià)格：1932
  • 產(chǎn)品庫(kù)存：123
  • 產(chǎn)品文檔：
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簡(jiǎn)單介紹：
石蠟包埋組織基因組DNA提取試劑盒本試劑盒采用加熱處理方式快速去除石蠟，同時(shí)應(yīng)用特殊的裂解條件釋放組織切片中的 DNA，此外，采用可以特異性結(jié)合 DNA 的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng)進(jìn)行石蠟切片 DNA 提取，所提 DNA 分子純度高，可直接進(jìn)行 PCR、Real-Time PCR，酶切和雜交等相關(guān)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，整個(gè)過程an全可靠、簡(jiǎn)單快速。
詳情介紹：


石蠟包埋組織基因組DNA提取試劑盒
產(chǎn)品及特點(diǎn)
本試劑盒采用加熱處理方式快速去除石蠟，同時(shí)應(yīng)用特殊的裂解條件釋放組織切片中的 DNA，此外，采用可以特異性結(jié)合 DNA 的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng)進(jìn)行石蠟切片 DNA 提取，所提 DNA 分子純度高，可直接進(jìn)行 PCR、Real-Time PCR，酶切和雜交等相關(guān)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，整個(gè)過程an全可靠、簡(jiǎn)單快速。

它具有下列特點(diǎn)：
1. 簡(jiǎn)便快捷：操作快速方便；
2. 操作an全：不需要二甲苯等有毒試劑；
3. 穩(wěn)定可靠：得率高，純度好，重復(fù)性強(qiáng)。
4. 提取得到的 DNA 產(chǎn)物可用于 PCR 和 real-time qPCR、SNP 基因分析和STR基因分析、yao物基因組學(xué)研究等。


成分規(guī)格

Buffer GL

15ml

30ml

60ml

Buffer GA

15ml

30ml

60ml

Buffer W1（concentrate）

13ml

26ml

52ml

Buffer W2（concentrate）

15ml

30ml

2×30ml

Buffer EBE

10ml

10ml

30ml

Proteinase K

1ml

2×1ml

4×1ml

Spin Column with Collection Tubes

50套

100套

200套

蛋白酶 K 于-20℃　，其他組分室溫（15 - 25℃），可保存12 個(gè)月

本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于其它用途


使用方法
自備試劑
無(wú)水乙醇、RNase A（可選）。
（注 意：使用前請(qǐng)先在緩沖液 Buffer W1 和 Buffer W2 中加入無(wú)水乙醇，加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽）
1. 取石蠟切片（5 - 10 um 厚，1×1 cm2大?。? - 8 張于 1.5 ml 無(wú)菌離心管中，加入250ul Buffer GA，90℃金屬浴或水浴30 min。
（注 意：若 buffer GA 出現(xiàn)沉淀，在溫水中溶解后再使用；此步驟的目的是溶解并脫去切片中的石蠟，裂解組織細(xì)胞釋放 DNA，并修復(fù)由甲醛變性的核酸，孵育時(shí)間過長(zhǎng)和溫度過高都會(huì)造成DNA的斷裂）
2. 室溫 10,000 rpm 離心 1 min，小心穿過石蠟層，吸取 200 ul 包含組織的液體到一新的離心管中。
（注 意：用 1ml 槍頭吸取，剪去槍頭jian端，否則組織吸不出來(lái)造成堵塞）
3. 加入蛋白酶 K 20 ul，混合均勻，56℃水浴。
（注 意：期間每隔 10 min 混勻一次，若 1h 后組織仍未消化完全，可繼續(xù)消化甚至過夜，至組織完全消化為準(zhǔn)）
4. 將消化后的樣品 10000 rpm 離心 1 min，吸取上清到一新的1.5ml 離心管中，加入250ul Buffer GL 渦旋混勻。
5. 加入 250 ul 無(wú)水乙醇，渦旋震蕩充分混勻，短暫離心收集管壁上的液體。
6. 將一吸附柱放入收集管中，將液體全部轉(zhuǎn)入到吸附柱中，10000 rpm離心30 s，棄濾液。

7. 向吸附柱中加入 500 ul Buffer W1，10000 rpm 離心 30 s，棄濾液。

（注 意：Buffer W1 為濃縮液，按要求加入無(wú)水乙醇，用后應(yīng)立即蓋緊瓶蓋以防酒精揮發(fā)
8. 向吸附柱中加入 600 ul 漂洗液 Buffer W2，10000 rpm 離心30 s，棄濾液。
（注 意：Buffer W2 為濃縮液，按要求加入無(wú)水乙醇，用后應(yīng)立即蓋緊瓶蓋以防酒精揮發(fā)）
9. 重復(fù)操作步驟 8 一次。
10. 將吸附柱放回收集管中，12,000 rpm 離心 2 min，以去除吸附膜上的乙醇。
11. 將吸附柱轉(zhuǎn)入一干凈的離心管中，向吸附膜的中間部位懸空滴加30 - 100 ul Buffer EB，室溫放置 2 min，10000 rpm 離心 1 min，收集 DNA。
(注 意：洗脫液體積不應(yīng)少于 30 μl，體積過小影響回收效率。為增加基因組DNA 的得率，可將離心得到的溶液再次加入吸附柱中，室溫放置 2 min，10000 rpm 離心 1 min。洗脫液的pH對(duì)于洗脫效率有很大影響。若用水作洗脫液應(yīng)保證其 pH 值在 7.0 - 8.5 范圍內(nèi)，pH 值低于7.0 會(huì)降低洗脫效率)

注意事項(xiàng)
1. 拿到樣品后要盡快在 4 - 10%的福爾馬林中固定，固定時(shí)間以8 - 24 h 內(nèi)為宜，時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致基因組斷裂，影響下游實(shí)驗(yàn)；
2. 確保包埋前的樣品徹底脫水，殘留的福爾馬林會(huì)抑制 PCR 檢測(cè)酶的作用；
3. 本產(chǎn)品適用于醫(yī)學(xué)、科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究；
4. 本產(chǎn)品所提 DNA 的完整性依賴于樣本類型、儲(chǔ)存時(shí)間以及固定條件，如果甲醛固定時(shí)間過長(zhǎng)或樣本存放時(shí)間過久（＞1 年）則易導(dǎo)致 DNA 完整性受損，無(wú)法擴(kuò)出長(zhǎng)片段；
5.若 Buffer GA、GL、W1 中有沉淀，可在 37℃水浴中溶解，搖勻后使用。
石蠟包埋組織基因組DNA提取試劑盒
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