產(chǎn)品詳情
簡單介紹:
本試劑盒適用于從瓊脂糖凝膠中回收 DNA 片段。含有目的片段的凝膠溶于溶膠液中,在合適的條件下,DNA 片段可特異地結合到磁珠上,通過清洗液的清洗可去除雜質(zhì),在低鹽、高 pH 條件下洗脫,得到純度較高的 DNA 片段。該試劑盒操作簡便,質(zhì)量穩(wěn)定,得率高,得到的 DNA 片段可用于酶切、連接、測序、PCR 模板等后續(xù)的實驗。
詳情介紹:
磁珠法DNA片段凝膠回收試劑盒
產(chǎn)品特點
本試劑盒適用于從瓊脂糖凝膠中回收 DNA 片段。含有目的片段的凝膠溶于溶膠液中,在合適的條件下,DNA 片段可特異地結合到磁珠上,通過清洗液的清洗可去除雜質(zhì),在低鹽、高 pH 條件下洗脫,得到純度較高的 DNA 片段。該試劑盒操作簡便,質(zhì)量穩(wěn)定,得率高,得到的 DNA 片段可用于酶切、連接、測序、PCR 模板等后續(xù)的實驗。
它具有下列特點:
1. 快速:步驟少,操作簡便;
2. 高效:10μl 磁珠可吸附 10 μg 以上的 DNA 片段,回收效率在80%以上。
成分規(guī)格
磁珠 |
0.5ml |
1ml |
2×1ml |
Buffer GS |
25ml |
50ml |
100ml |
Buffer EB |
10ml |
10ml |
30ml |
Buffer W2(concentrate) |
15ml |
30ml |
60ml |
本試劑盒在室溫(15 - 25℃)、干燥條件下可穩(wěn)定保存 12 個月 |
|||
本產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于其它用途 |
使用方法
1. 切膠:用干凈刀片將目的 DNA 條帶切下,盡量切除不含DNA 的凝膠。
(注 意:紫外線對 DNA 片段有損壞作用,切膠要迅速,避免長時間照射,同時做好眼睛及皮膚的防護)
2. 稱重:將切下的含有目的 DNA 條帶的凝膠切成小塊,放入2 ml 塑料離心管中,稱重。(注 意:先稱一個空的 2 ml 離心管的重量,放入凝膠塊后再稱一次,兩次重量相減得到凝膠的重量)
3. 溶膠:加入等體積 Buffer GN,60℃水浴,每隔 2-3 min 上下振蕩,直到凝膠完全溶解。加入等體積的異丙醇混勻,再加入 10μl 磁珠混勻 5 分鐘。
(注 意:如凝膠重量為 100 mg,其體積可視為 100 μl,則加入 100 μl Buffer GN;如凝膠濃度大于2%,所用溶膠液體積加倍)
4. 將離心管置于磁力架上靜置 1 min,磁珠完全吸附后,吸去液體。
5. 將離心管從磁力架上取下,加 600 μl Buffer W2,旋渦充分混勻30 s。
(注 意:Buffer W2 在使用前按要求加入無水乙醇,用后應立即蓋緊瓶蓋,以防乙醇揮發(fā))
6. 將離心管置于磁力架上靜置 1 min,磁珠完全吸附后,吸去液體。
6. 將離心管置于磁力架上靜置 1 min,磁珠完全吸附后,吸去液體。
7. 將離心管置于磁力架上,開蓋室溫放置 5-10min。
(注 意:乙醇殘留會抑制后續(xù)的酶反應,所以晾干時要確保乙醇揮發(fā)干凈。但也不要干燥過度,以免DNA 難以洗脫)
8. 將離心管從磁力架上取下,加入 30-50 μl Buffer EB,充分震蕩1-2 min。
9. 將離心管置于磁力架上靜置 1 min,磁珠完全吸附后,小心將溶液轉(zhuǎn)移至新的離心管中,并于適當條件保存。
(注 意:為增加洗脫效率,可將洗脫液在 60℃預熱。如需使用去離子水洗脫,可用NaOH調(diào)整其pH值在 7.0 - 8.5 之間)