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產品詳情
  • 產品名稱:裂谷熱病毒RT-PCR試劑盒

  • 產品型號:50次
  • 產品廠商:通蔚生物
  • 產品價格:3490
  • 產品庫存:100
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簡單介紹:
裂谷熱病毒RT-PCR試劑盒一站式,用戶不需要單獨準備每種成分,包括引物和對照。根據裂谷熱病毒的保守基因序列設計的引物,具有良好的特異性。靈敏度可以達到 1000 拷貝/反應。 使用一管式 RT-PCR 技術,RT 和 PCR 兩步在一個試管內完成,不需要中間轉移樣品,降低了操作誤差和可能的污染。 本產品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。本產品只能用于科研,不能用于臨床。
詳情介紹:
裂谷熱病毒RT-PCR試劑盒
產品及特點: 
裂谷熱病毒(Rift Valley Fever Virus,RVFV)是一種 RNA 病毒,病毒主要經蚊叮咬或通過接觸染疫動物傳播給人,多發(fā)生于大雨季節(jié)。病毒性出血熱可導致動物和人的嚴重,引起嚴重的公共衛(wèi)生問題和因牲畜減少而導致的經濟下降問題,人感染病毒 2-6 天后,突然出現流感樣表現,發(fā)熱、肌肉痛、背痛,一些病人可發(fā)展為頸硬、畏光和嘔吐,在早期,這類病人可能被誤診為腦膜炎。人類染上裂谷熱病毒后病死率通常較低,但每當洪水季節(jié)來臨,在肯尼亞和索馬里等非洲國家則會有數百人死于該病,因此裂谷熱病毒的快速準確鑒定對該病的預防和檢疫有著重要作用。為此本公司開發(fā)了本產品,可用于在科研領域快速定量檢測裂谷熱病毒。
1. 一站式,用戶不需要單獨準備每種成分,包括引物和對照。
2. 根據裂谷熱病毒的保守基因序列設計的引物,具有良好的特異性。
3. 靈敏度可以達到 1000 拷貝/反應。
4. 使用一管式 RT-PCR 技術,RT 和 PCR 兩步在一個試管內完成,不需要中間轉移樣品,降低了操作誤差和可能的污染。
5. 本產品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。
6. 本產品只能用于科研,不能用于臨床。
規(guī)格及成分:

編號

成分

規(guī)格

試劑一

5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer

200 μL(橘黃蓋)

試劑二

MMLV-Taq Mix

75 μL(紅蓋

試劑三

超純水

1 mL(亮黃蓋)

試劑四

裂谷熱病毒 RT-PCR 引物混合液

100 μL(白蓋)

試劑五

裂谷熱病毒 RT-PCR 陽性對照(1×10E8 /μL)

50 μL(黃蓋)

試劑六

使用手冊

1 份

注:為避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供專一的DNA 片段作為陽性對照。 
運輸及保存:
低溫運輸,-20℃保存,保存期限為 12 個月。收到貨后陽性對照需要跟其他成分分開放置,因為其容易污染其他成分,造成假陽性。
自備試劑:
樣品 RNA。
裂谷熱病毒RT-PCR試劑盒
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備:
1. 如果有 N 個樣品,必須設置 N+2 個提取,多出的一個是 PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用 10μL 裂谷熱病毒 PCR陽性對照的 1000 倍稀釋液作為制備的陽性對照??梢杂盟鳛橹苽涞年幮詫φ?。制備所得成為樣品 RNA。
2. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 RNA 提取試劑盒兼容??梢赃x購本公司的柱式病毒 RNAout。
二、設置RT- PCR 反應(20μL 體系):
3. 如果有 N+2 個樣品,則標記 N+4 個 PCR 管(額外增加的兩個管一個是RT-PCR 陽性對照,另一個是 RT-PCR 陰性對照)并按照下表在 PCR 管中加入下列成分:

成份

N+2 個

樣品管

RT-PCR

陰性對照

RT-PCR

陽性對照

5×雙酶一管式RT-PCR Buffer

4 μL

4 μL

4 μL

裂谷熱病毒 RT-PCR 引物混合液

2 μL

2μL

2μL

N+2 個制備的 RNA 樣品

12.5μL

--

--

超純水

--

12.5μL

--

裂谷熱病毒 RT-PCR 陽性對照的 1000倍稀釋液

--

--

12.5μL

MMLV-Taq Mix

1.5 μL

1.5 μL

1.5 μL

4.上機進行 RT-PCR,RT-PCR 反應參數為:

過程

溫度

時間

逆轉錄

42℃

30 min

預變性

95℃

5 min

PCR 反應35個循環(huán)

95℃

30 sec

58℃

30 sec

72℃

20 sec

延伸

72℃

7 min

三、電泳檢測:
5. 瓊脂糖電泳檢測擴增效果。如果陰性對照有擴增產物或陽性對照無擴增產物,則說明實驗失敗,需要分析實驗失敗的原因。只有在陰性對照沒有擴增產物、陽性對照必須有預期條帶出現,才有必要分析樣品的實驗結果,如果有預期片段大小的擴增產物則為陽性,如果無則為陰性。 
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