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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:亞洲柑桔黃龍病菌PCR試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào):50次
  • 產(chǎn)品廠商:通蔚生物
  • 產(chǎn)品價(jià)格:2990
  • 產(chǎn)品庫存:100
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
亞洲柑桔黃龍病菌PCR試劑盒引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增亞洲柑桔黃龍病菌,與其他病原沒有交叉反應(yīng)。提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。PCR mix 中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次,但只能用于科研。
詳情介紹:
亞洲柑桔黃龍病菌PCR試劑盒
產(chǎn)品及特點(diǎn): 
亞洲柑桔黃龍病菌(Candidatus Liberobacter Asiaticum)是一種類菌體,柑桔感染黃龍病后,全年均可發(fā)生,一般以夏梢和秋梢發(fā)病多,其次是春梢。新梢的癥狀是葉片表現(xiàn)黃化和黃綠相間的斑駁。在葉片凋落后,枝梢上新長出的葉片表現(xiàn)缺素狀的花葉。病梢變短、生勢(shì)衰弱,病葉黃厚、變小,且易脫落,形成枯枝。開花不適時(shí),花開的多、落得多。果小而畸形,或紅鼻果。后期,根部往往表現(xiàn)為小根腐爛。此菌可以侵染蕓香科柑橘屬和金橘屬植物,引發(fā)癥狀。通過菟絲子,此菌可以侵染長春花。在自然界,蕓香科蠔殼刺屬和木蘋果屬植物可能受此菌侵染,九里香屬植物常見著生大量傳播柑橘黃龍病的柑橘木虱,但其體內(nèi)未見病原菌。因此亞洲柑桔黃龍病菌檢測具有重要的意義。本試劑盒根據(jù) PCR 原理開發(fā),它具有下列特點(diǎn): 
1. 即開即用,用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增亞洲柑桔黃龍病菌,與其他病原沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次,但只能用于科研。
規(guī)格及成分:

編號(hào)

成分

規(guī)格

試劑一

PCR MagicMix 3.0

1 mL(紅蓋)

試劑二

超純水

1 mL(亮黃色)

試劑三

亞洲柑桔黃龍病菌 PCR 引物混合液

100 μL(白蓋)

試劑四

亞洲柑桔黃龍病菌 PCR 陽性對(duì)照(1×10E8 /μL)

50 μL(黃蓋)

試劑五

使用手冊(cè)

1 份

運(yùn)輸及保存:
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對(duì)照需要單獨(dú)放置,不要污染其他試劑。
自備試劑:
樣品 DNA。
亞洲柑桔黃龍病菌PCR試劑盒
使用方法: 
一、樣品 DNA 的制備:
1. 用自選方法純化N+2個(gè)樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。可以選用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個(gè)樣品,則需要做N+2個(gè)提取,包括一個(gè)樣品制備陽性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽性對(duì)照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 亞洲柑桔黃龍病菌 PCR 陽性對(duì)照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系): 
3. 對(duì)N+2個(gè)樣品,在PCR時(shí)需要增加一個(gè)PCR陽性對(duì)照和一個(gè)PCR陰性對(duì)照,故需要設(shè)置N+4個(gè)反應(yīng)。在N+4個(gè)PCR管中分別加入下列成分:

成份

N+2 個(gè)樣品管

PCR 陰性對(duì)照

PCR陽性對(duì)照

PCR Magic Mix 3.0

20μL

20μL

20μL

亞洲柑桔黃龍病菌PCR 引物混合液

2μL

2μL

2μL

N+2個(gè)樣品DNA模板

18μL

--

--

PCR 陰性對(duì)照(水)

--

18μL

--

PCR 陽性對(duì)照(亞洲柑桔黃龍病菌PCR陽性對(duì)照1000倍稀釋液)

--

--

18μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng):

過程

溫度

時(shí)間

預(yù)變性

95℃

5 min

PCR 反應(yīng)(35 個(gè)循環(huán))

95℃

30 sec

55℃

30 sec

72℃

40 sec

延伸

72℃

7 min

三、電泳檢測:
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增,否則實(shí) 驗(yàn)無效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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