堿性蛋白酶(AKP)測(cè)試盒
測(cè)定方法: 分光光度法
測(cè)定規(guī)格: 50管/24樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意: 正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
AKP是指在堿性條件下催化蛋白質(zhì)肽鍵水解的酶類(lèi),屬于絲氨酸蛋白酶。此外,該酶還能夠水解酯鍵、酰胺鍵,具有轉(zhuǎn)酯及轉(zhuǎn)肽的功能。該酶是主要工業(yè)用酶之一,廣泛應(yīng)用于制藥、絲綢、食品、制革等行業(yè)。
測(cè)定原理:
在堿性條件下,AKP水解酪蛋白生成酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸生成鎢藍(lán);鎢藍(lán)在680nm有特征吸收峰,測(cè)定680nm吸光度增加速率,來(lái)計(jì)算AKP活性。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、1.5 mL EP管、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體90mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加10 mL蒸餾水溶解。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加入20 mL試劑一,沸水浴中磁力攪拌溶解。(可在燒杯上蓋一層保鮮膜,注意觀察,避免水分全部蒸發(fā),一般加熱15-30分鐘,該試劑為過(guò)飽和試劑,充分混勻后仍出現(xiàn)顆粒物不溶物不影響使用)。
試劑四:粉劑×1瓶, 4℃保存。臨用前加50 mL蒸餾水溶解。
試劑五:液體10mL×1瓶,4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品:液體1mL×1支,0.25 μ mol/mL標(biāo)準(zhǔn)酪氨酸溶液,4℃保存。